Ciencias Exactas y Ciencias de la Salud
Permanent URI for this collectionhttps://hdl.handle.net/11285/551039
Pertenecen a esta colección Tesis y Trabajos de grado de las Maestrías correspondientes a las Escuelas de Ingeniería y Ciencias así como a Medicina y Ciencias de la Salud.
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- Characterization of the antibody profile of colostrum from mothers with obesity(Instituto Tecnológico y de Estudios Superiores de Monterrey, 2025-05-21) García Alonso, Claudia Angélica; Genevieve Brunck, Marion Emilie; emipsanchez; García Ramírez, Noemí; Mancilla Herrera, Ismael; González Castillo, Elena Cristina; Escuela de Medicina y Ciencias de la Salud; Campus MonterreyObesity is a state of low-grade inflammation, characterized by dysregulated metabolic and immune processes. Maternal health status is known to influence the immunological composition of colostrum. Therefore, this study aimed to evaluate the effects of maternal obesity on the antibody profile of colostrum, particularly focusing on vaccination-derived antibody responses, the presence of autoantibodies, and their functional capacity. For this, blood and colostrum samples from postpartum women were collected. ELISA assays were used to quantify antigen-specific IgG and IgA antibodies against SARS-CoV-2 and Tdap vaccine antigens, and to detect autoantibodies targeting mitochondrial DNA (mtDNA) and histone H3. Antibody-Dependent Cellular Phagocytosis (ADCP) was assessed using neutrophils and E. coli bioparticles to evaluate the functional effector capacity of colostrum and blood antibodies. Lean mothers exhibited higher vaccine-specific IgA responses, particularly against SARS-CoV-2. Anti-H3 autoantibodies were detected in both tissues but were lower in the colostrum of obese mothers. Finally, colostrum antibodies showed a reduced phagocytic activity compared to plasma, with a trend towards a greater functionality in samples from lean mothers.
- Análisis estructural y conformacional de péptidos derivados de la proteína HSP60 como moduladores del complejo TLR4/MD2: Una aproximación In silico e In vitro(Instituto Tecnológico y de Estudios Superiores de Monterrey, 2023-05) Vila Casahonda, Rafael Gustavo; Guerrero Beltrán, Carlos Enrique; emipsanchez; Scior, Thomas; García Ramírez, Noemí; Escuela de Medicina y Ciencias de la Salud; Campus Monterrey; Lozano Aponte, JorgeLas enfermedades cardiovasculares (CVD, por sus siglas en inglés), representan uno de los mayores retos para la sociedad debido a su alta incidencia y mortandad, siendo consideradas la principal causa de muerte en el mundo, con una estable tendencia al alza, a pesar de los avances en tratamientos médicos. La etiología de las CVD es diversa, con múltiples estímulos capaces de inducir efectos deletéreos en el sistema cardiovascular, tales como la inducción de la remodelación tisular, la generación de estrés oxidante, la disfunción endotelial y la activación de respuestas inflamatorias. El tejido endotelial, presente en la capa interna de la vasculatura, ha sido reconocido como un órgano paracrino debido a su capacidad de regulación procesos celulares como la angiogénesis, la hemostasia y la modulación de respuestas inflamatorias a partir de la producción de moléculas mensajeras como el óxido nítrico (NO, por sus siglas en inglés) y la secreción de moléculas de señalización, como las citocinas. El tejido endotelial expresa diversos receptores celulares de manera basal, tales como la familia de los receptores de tipo toll (TLR, por sus siglas en inglés), los receptores de tipo NOD (NLR, por sus siglas en inglés), receptores RIG-1 (RLR, por sus siglas en inglés) y los receptores de lectina tipo C (CLR, por sus siglas en inglés), los TLR destacan por su abundancia y sensibilidad en la inducción de expresión en el endotelio. Dentro de la familia TLR, destaca el receptor TLR4, por abundancia en la expresión basal y a su sobreexpresión en condiciones patológicas e.g., CVD. El receptor TLR4 es el encargado de detectar diversos DAMPS e.g., moléculas endógenas deslocalizadas o liberadas de la célula como la proteína de choque térmico 60 (HSP60, por sus siglas en inglés) y de PAMPS, como oligosacáridos y lipopolisacáridos (LPS), siendo este último su activador por excelencia. La proteína HSP60, es una proteína chaperona conservada evolutivamente, con la cual se ha visto una asociación con el desarrollo de respuestas inflamatorias en enfermedades CVD, sobre todo cuando ésta es detectada en circulación por medio del complejo TLR4/MD2. A pesar de contar con un potencial en el desarrollo de moduladores del TLR4, a la fecha, no existen estructuras cristalográficas del complejo TLR4/MD2 ligado a la proteína HSP60 o péptidos derivados de la misma, lo cual limita en gran medida la comprensión del efecto estructural de los mismos sobre el receptor. Sin embargo, en la actualidad, con el aumento en el poder computacional y el desarrollo de técnicas bioinformáticas como el acoplamiento molecular (molecular docking) y la dinámica molecular (molecular dynamics), se han logrado analizar atomísticamente estructuras proteicas y proponer modelos teóricos de interacción entre un ligando y una proteína. basados en las leyes de newton del movimiento y en mecánica estadística. Para ese proyecto de tesis, se desarrolló una primera aproximación in silico de los efectos conformacionales de 2 péptidos de 15 aminoácidos de longitud derivados de la proteína HSP60 en el complejo receptor TLR4/MD2. Para esto, se partió del análisis estructural por medio de molecular dynamics, de la versión dimérica del TLR4/MD2 en ausencia y presencia de agonistas y antagonistas canónicos, LPS y lípido IVa, respectivamente, permitiendo tener una referencia estructural del efecto asociado a cada ligando. Posteriormente, se evaluaron los efectos del acoplamiento por molecular docking, previamente determinado en el grupo de investigación, en la estructura del receptor TLR4/MD2 por la técnica de molecular dynamics. A partir de lo obtenido en la versión dimérica del complejo TLR4/MD2, se procedió a evaluar el efecto de los controles y del acoplamiento de los péptidos, en la versión tetramérica del complejo TLR4/MD2 (TLR4/MD2-TLR4/MD2), la cual se asocia biológicamente a una activación de la cascada de señalización proinflamatoria. A partir de los análisis del tetrámero, se identificaron efectos estructurales presentes en el complejo receptor y se identificaron, evaluaron interacciones intracelulares presentes entre el ligando de interés con la subunidad MD2, del complejo TLR4/MD2, y se compararon con lo reportado en literatura. Con el fin de determinar si los resultados in silico mostrarían un comportamiento funcional in vitro, se realizaron análisis de actividad metabólica por medio de la prueba de azul de Alamar, utilizando tratamientos a concentraciones de 100 ng/mL y 1000 ng/mL por 24 horas de LPS, péptido 2 y péptido 4, con el fin de activar los potenciales mecanismos moduladores del complejo TLR4/MD2. Los resultados preliminares mostraron que con dichas concentraciones no se afectó la viabilidad celular. Concluyendo la evaluación in vitro, se evaluó el efecto de los tratamientos experimentales, a 100 ng/mL y 1000 ng/mL por 24 horas con el objetivo de determinar la presencia de citocinas proinflamatorias producto de la activación del complejo TLR4/MD2. Los resultados del perfil de expresión de citocinas mostraron un nivel de expresión diferencial en los tratamientos respecto al control.
- Identificación de fragmentos de ADN mitocondrial y su relación con los niveles de citocinas pro-inflamatorias circulantes en niños con obesidad y síndrome metabólico(Instituto Tecnológico y de Estudios Superiores de Monterrey, 2021-06-10) Velásquez Esparza, Mónica Malú; GARCIA RAMIREZ, NOEMI; 25011; García Ramírez, Noemí; puelquio, emipsanchez; Aguilera Aguirre, Leopoldo; González Castillo, Elena Cristina; Treviño Alvarado, Victor Manuel; Escuela de Medicina y Ciencias de la Salud; Campus Monterrey; García Rivas, Gerardo de JesúsSe ha descrito que en la obesidad (Ob) y el síndrome metabólico (SM), la generación de Especies Reactivas al Oxigeno (ROS, por sus siglas en inglés) incrementa gracias al aumento de los ácidos grasos libres (Manna & Jain, 2015). Las ROS tienen la capacidad de oxidar macromoléculas, como el ADN, particularmente al ADN mitocondrial (ADNmt), debido a su carencia de histonas; provocando su fragmentación. Estudios previos demostraron que al añadir H2O2 a mitocondrias aisladas de riñón de ratas, el ADNmt se fragmentaba, siendo las subunidades MTND3 y MTCO1 unos de los principales fragmentos liberados a través del poro de transición mitocondrial (García & Chávez, 2007). Una vez en plasma, el ADNmt puede actuar como una Molécula Asociada a Daño (DAMP) y unirse a receptores tipo Toll-like-9 de leucocitos circulantes y activar el NF-κβ el cual promueve la síntesis de citocinas pro-inflamatorias (West & Shadel, 2017), o unirse a los receptores NLRP3 y formar el inflamasoma que activa a la caspasa-1 y a su vez, promueve la activación de IL-1β e IL-18, generando así, una respuesta inflamatoria crónica (Nakayama & Otsu, 2018). En un estudio realizado en pacientes con diabetes tipo 2, encontraron un aumento en el ADNmt en plasma en comparación al grupo control, así como una correlación positiva con la expresión de IL-1β (Bae et al., 2019). El objetivo de este trabajo se centra en analizar fragmentos específicos (MTND3 y MTCO1) del ADNmt y su relación con la expresión de citocinas pro-inflamatorias de niños con Obesidad y Síndrome Metabólico Para este estudio, se incluyeron 40 niños con obesidad y 40 niños con síndrome metabólico. Se midió el total de ADN oxidado (8-OH-dG) plasmático por medio de ELISA. Se amplificó el ADN mitocondrial íntegro presente en plasma por medio de PCR punto final y se cuantificó por medio de Picogreen. Se cuantificaron los fragmentos MTND3 y MTCO1 en plasma mediante PCR en tiempo real. Las citocinas se midieron con citometría de flujo. Se realizaron análisis ANOVA y de correlación de Spearman tomando como significancia una p<0.05. En cuanto los resultados obtenidos, se observó un incremento significativo de oxidación (8-OH-dG) en el grupo Ob y SM en comparación con el grupo control (p=<0.001), 3 así como un incremento en el grupo de SM 4-5 con respecto al grupo Ob (p=0.0017). De igual forma, se encontró una correlación positiva y significativa entre los niveles de 8-OHdG y de Tg (r=0.3375, p=0.0166) en el grupo Ob. No se identificaron diferencias significativas en los fragmentos MTND3 y CO1 en los diferentes grupos. Por su parte, se observó una disminución significativa de los niveles de ADNmt íntegro en los grupos Ob, SM 3F y SM 4-5F en comparación con el grupo control (p=<0.0001) y una disminución entre el grupo Ob y SM 4-5F (p=0.0044). Se normalizaron los fragmentos con la presencia de ADNmt íntegro y se observó un mayor daño en el grupo en los grupos Ob, SM 3F y SM 4-5F en relación al grupo control (p=<0.0001). Al momento de realizar las correlaciones de ADNmt íntegro y los fragmentos con los niveles de citocinas, se identificó una correlación positiva para CO1 en el grupo de Ob con IL-6 (r=.3185, p=0.0431), IL-18 (r=0.397, p=0.0057), IL-23 (0.313, p=0.0245), IL-33 (r=0.2864, p=0.0366), IFN-α (r=0.321, p=0.0218). De igual forma hubo una correlación positiva y significativa para ND3 en el grupo Ob con IL-6 (r= 0.3481, p=0.0297), IL-18 (r=0.281, p=0.0396), IL-23 (r=0.272, p=0.0449), IL-33 (r=0.302, p=0.0292) IFN-α (r=0.348, p=0.0140). Por su parte ND3 en SM 3F presentó correlación positiva y significativa con IL-8 (r=0.4389, p=0.0205), IL-18 (r=0.339, p=0.0386), IL-33 (r=0.331, p=0.0431). CO1 en SM 3F tuvo correlación positiva y significativa con IL-1β (r =0.4776, p= 0.0367), IL-8 (r=0.5594, p=0.0034), IL-18 (r=0.332, p=0.0421), IL-33 (r=0.365, p=0.0280). Así mismo, CO1 tuvo correlación significativa con IL-8 (r=0.6000, p=0.0367), con IL-17 (r= 0.7333, p=0.0156) en el grupo SM 4-5F. Finalmente, se encontró una correlación significativa y positiva del ADNmt íntegro con IL- 6 (r=0.320, p= 0.0482), IL-23 (r=0.316, p= 0.0467), IL-33(r=0.328, p= 0.0312) en el grupo Ob, y con IFN-α (r=0.647, p= 0.0006) en el grupo SM 3F. Por otro lado, se identificó una correlación negativa y significativa del ADNmt íntegro con IL-8 (r=-767, p= 0.0107), IL-10 (r=-0.970, p= 0.0003), IL-12 (r=-0.661, p= 0.0299), IL-23 (r=-0.631, p= 0.0156), IL-33 (r=- 0.821, p= 0.0027) En conclusión, la obesidad y el síndrome metabólico se caracterizan por daño y fragmentación del ADN mitocondrial, lo que puede estar teniendo un papel importante en la activación del sistema inmune.