Ciencias Exactas y Ciencias de la Salud
Permanent URI for this collectionhttps://hdl.handle.net/11285/551039
Pertenecen a esta colección Tesis y Trabajos de grado de las Maestrías correspondientes a las Escuelas de Ingeniería y Ciencias así como a Medicina y Ciencias de la Salud.
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- Folates, amino acids, and phenotypic analyses of Methionine Synthase Arabidopsis thaliana T-DNA mutants(Instituto Tecnológico y de Estudios Superiores de Monterrey, 2020-06-15) Alcudia Zamudio, Jorge Alberto; ALCUDIA ZAMUDIO, JORGE ALBERTO; 886409; Díaz de la Garza, Rocío Isabel; mla/puemcuervo; Garza Aguilar, Sara Margarita; García Salinas, Carolina; School of Engineering and Sciences; Campus Monterrey; Ramos Parra, Perla AzucenaLas plantas son la principal fuente de micronutrientes para humanos. Los folatos (vitamina B9) y los aminoácidos esenciales, como la metionina, están presentes en niveles limitados en las plantas. Además, los folatos y la metionina interactúan en el metabolismo de un carbono (1C), por lo tanto, estas moléculas tienen un rol clave en el crecimiento y desarrollo de las plantas. Arabidopsis thaliana tiene tres isoenzimas de metionina sintasa (ATMS1, ATMS2 y ATMS3), enzimas responsables de la síntesis de metionina. ATMS1 y ATMS2 están localizadas en citosol y ATMS3 en plástidos. El presente trabajo tuvo como objetivo comprender el rol de cada isoenzima en el fenotipo visual de crecimiento y el contenido de metabolitos en ocho mutantes de T-DNA de A.thaliana. Se realizó una selección de mutantes de T-DNA para aislar plantas homocigotas y heterocigotas para cada isoforma. Subsecuentemente se realizó un estudio fenotípico in vitro, se cosecharon las plantas, y finalmente, se cuantificó el perfil de aminoácidos por HPLC-fluorescencia y folatos por HPLC-electroquímico. Interesantemente sólo se identificaron plantas homocigotas para ATMS2 y ATMS3, indicando que las líneas mutantes homocigotas de ATMS1 son letales debido a que sólo se encontraron plantas heterocigotas. Diferencias significativas fueron encontradas en germinación, peso de plántulas, desarrollo de la planta, tamaño de cotiledón y de raíz, y peso de semillas de las líneas mutantes con respecto a las plantas control. También, el perfil de aminoácidos se vio diferencialmente afectado en aminoácidos de las familias de síntesis de aspartato, glutamato, y aminoácidos aromáticos. 5-CH3-THF fue el principal tipo de folato caracterizado en todas las plantas de Arabidopsis, el cual mostró diferencias significativas con incrementos de hasta 46% en los contenidos de las líneas mutantes de ATMS3 con respecto a las plantas control. Además, resultados preliminares indican cambios en el perfil de poliglutamilación de 5-CH3-THF en las plantas mutantes en las cuales se encontró que acumulan mayoritariamente de 6 a 9 residuos de glutamato a diferencia de las plantas control que acumula principalmente 1 residuo de glutamato. Estos resultados sirven como los primeros pasos para un estudio de genómica funcional y conducen a un interesante trabajo futuro de aspectos de funcionalidad aún desconocidos de las isoenzimas de metionina sintasa en plantas.