Ciencias Exactas y Ciencias de la Salud
Permanent URI for this collectionhttps://hdl.handle.net/11285/551039
Pertenecen a esta colección Tesis y Trabajos de grado de las Maestrías correspondientes a las Escuelas de Ingeniería y Ciencias así como a Medicina y Ciencias de la Salud.
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- Andamios porosos de zeína: prueba de concepto de su uso en el cultivo de células de mamífero.(2017-12-14) Portales Cabrera, Cynthia Guadalupe; Trujillo-de Santiago, Grissel.; Álvarez, Mario Moises; Montes Fonseca, Silvia Lorena; Mendoza Buenrostro, Christian CarlosLas espumas son materiales porosos y de baja densidad, características convenientes en andamiajes para células de mamífero. En este proyecto se estudió la aptitud de espumas elaboradas a partir de zeína (la proteína más abundante del maíz) como andamios para adherir y mantener distintos cultivos celulares de mamíferos: fibroblastos de ratón (NIH 3T3 ATCC® CRL-1658™), fibroblastos humanos FH (fuente primaria) y células de adenocarcinoma mamario MCF-7 (ATCC® HTB-22™). Los andamios porosos se obtuvieron a partir de zeína termoplastificada, la cual fue sometida a un proceso de expansión por dióxido de carbono supercrítico. Estos andamios fueron estudiados bajo condiciones de cultivo continuo en cámaras microfluídicas o lote en placas de ultrabaja adherencia. Los dispositivos microfluídicos, con un volumen efectivo de 100 µl, se fabricaron a partir de polidimetilsiloxano (PDMS) y se conectaron a una bomba de jeringa utilizando tubería flexible. Cortes rectangulares de espuma de zeína fueron colocados al interior de la cámara microfluídica, se inocularon con células de mamífero y se sometieron a condiciones de flujo continuo de medio modificado de Dulbecco (DMEM) a 3 µL/min. Resultados de microscopía confocal demuestran que todas las líneas celulares exploradas presentaron adhesión celular a los andamios de zeína. Resultados de consumo de glucosa confirman que las células mantuvieron su viabilidad en todos los experimentos, 60- 84 horas en cultivo continuo y hasta 9 días en cultivo por lote. Estos resultados sugieren que los andamios elaborados a base de zeína se pueden utilizar como un andamio adecuado para el cultivo de tejidos e ingeniería celular. Foams are low-density porous materials, a property that makes them attractive for their use as scaffolds for mammalian cells. In this project, micro foams made from thermo-plasticized zein (the main protein of maize) were used as scaffolds to attach and culture mouse fibroblasts (cell line NIH 3T3 ATCC® CRL-1658™), human fibroblasts (primary cell line FH), and adenocarcinoma cell line MCF-7 (ATCC® HTB-22™) in continuous flow chambers or ultra-low attachment multiwall plates (batch system). Zein foams were produced by supercritical-CO2 expansion. We produced polydimethylsiloxane (PDMS) devices with 100 µl of effective-volume micro-channels that were connected with tubing to a syringe pump to implement continuous culture experiments. Rectangular slices of zein foam were placed into the flow chamber, they were seeded with the corresponding cell line, and the devices were continuously perfused with Dulbecco's modified Eagle medium (DMEM) at a flow rate of 3 µl. The systems were incubated at 37°C and 5% CO2. Different behaviors were observed for each cell line, but cell adhesion was found in all experiments and it was documented using confocal microscopy. Trends of the glucose consumption curves show that the cultures maintained their viability throughout of experiment, 60-84 h in continuous cultures and up to 9 days in batch cultures. These proof-of-concept experiments suggest that zein can be used as a surface scaffold for continuous cell culture and tissue engineering.